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20~25nt 짧은 RNA도 캡핑 가능할까? Vaccinia Capping Enzyme과 정제방법 총정리Short RNA, 예를 들어 20~25nt 길이의 RNA도 cap 구조를 부여할 수 있을까요? 많은 연구자들이 Vaccinia Capping Enzyme (NEB #M2080)을 활용한 Cap-0 합성을 계획할 때 가장 먼저 마주치는 고민입니다. 특히 in vitro transcription으로 합성된 짧은 RNA에 cap을 부여하려는 경우, 효소가 작동할지, 정제는 어떻게 해야 할지 명확한 정보가 부족하기 때문이죠.오늘은 이 질문에 명확한 답을 드리기 위해, NEB의 가이드라인과 함께 효율적인 짧은 RNA의 캡핑 조건 및 정제 방법까지 정리해 드리겠습니다. Vaccinia Capping Enzyme..

BCA, Bradford, Quant-iT™부터 형광 기반까지 바이오의약품 분석의 핵심 가이드바이오의약품 개발에서 단백질 정량(protein quantitation)은 품질 관리와 기능 분석의 출발점입니다. 하지만 단백질의 종류나 수정 여부(예: PEGylation, Glycosylation)에 따라 정량 결과가 달라질 수 있어, 어떤 정량법을 선택하느냐에 따라 데이터의 신뢰도가 크게 바뀝니다.오늘은 "A Comparison of Protein Quantitation Assays for Biopharmaceutical Applications" 논문을 바탕으로 6가지 대표적인 단백질 정량법(BCA, Bradford, CBQCA™, DC, Fluorescamine, Quant-iT™)의 장단점과 바이오의약품..

Q5 Site-Directed Mutagenesis Kit란?안녕하세요, 여러분! 오늘은 Q5 Site-Directed Mutagenesis Kit를 활용해 플라스미드에 원하는 변이를 손쉽게 도입하는 방법에 대해 알아보겠습니다. SDM은 유전자 기능 연구나 단백질 구조·기능 분석에 필수적인 기법인데요, Q5 Kit를 쓰면 복잡한 과정을 간편하게 수행할 수 있습니다.주요 특징Substitutions, Deletions, Insertions 모두 가능짧은 플라스미드에 최적화돼 높은 효율 보장KLD (Kinase, Ligase, DpnI) 반응으로 간편한 리서큘러라이제이션Q5 SDM Kit는 플라스미드의 특정 염기서열을 삽입·치환·제거할 때 사용하는 키트로, KLD 반응을 통해 간편한 circularizati..

소개LAMP (Loop-Mediated Isothermal Amplification) 실험을 준비하면서 여러 가지 검출 방법 때문에 고민해본 적 있으신가요? 진단 검사나 연구 프로젝트를 진행할 때, 적합한 LAMP 키트와 검출 방식을 선택하는 것이 신뢰할 수 있는 결과를 얻기 위해 매우 중요합니다. 이 가이드에서는 NEB의 WarmStart® LAMP 제품군—pH 기반의 컬러리메트릭(Colorimetric) 믹스부터 형광 검출 키트까지—의 모든 것을 설명하고, 프라이머, 염료, 대체 판독 방법에 대한 자주 묻는 질문에도 답변해 드립니다. 그럼 시작해볼까요?1. LAMP 이해하기: 검출 방법이 중요한 이유어떤 LAMP 반응은 선명한 노란색으로 변하고, 어떤 반응은 형광 채널에서 반짝이는 이유가 궁금하셨나요..

Mastering Human and Bacterial rRNA Depletion with NEBNext KitsRNA-Seq나 메타트랜스크립토믹스와 같은 고감도 RNA 분석 실험에서는 **리보솜 RNA(rRNA)**가 차지하는 비율을 줄이는 것이 매우 중요합니다. 특히, 인간(human)과 박테리아(bacterial) rRNA를 동시에 제거해야 하는 경우가 흔한데요. 이 글에서는 NEBNext v2 rRNA Depletion Kit를 활용하여 human + bacterial rRNA를 한 번에 효율적으로 제거하는 방법과, species-specific custom probe 제작 방법을 쉽고 자세히 설명드리겠습니다.1. rRNA Depletion의 중요성많은 생체 시료에는 전체 RNA 중 rRNA가 80..

고감도 Whole Genome Amplification for Low-Input DNA몇 femtograms(fg) 수준의 DNA로 전체 게놈을 증폭할 수 있다는 사실이 믿기시나요? 여러분의 소중한 single-cell 샘플, 희귀 미생물, 혹은 고대 DNA를 다룰 때, Whole Genome Amplification(WGA)만이 downstream 분자 분석을 가능하게 합니다. 이 가이드에서는 NEB의 phi29-XT WGA Kit를 깊이 파헤치고, 핵심 기능, 최적 워크플로우, 그리고 debranching과 RNA 제거에 대한 실용적인 팁을 알려드립니다. 이 글을 읽고 나면, 단 10 fg의 입력 DNA로도 견고하고 고수율의 게놈 라이브러리를 생성할수 있을 것입니다.유전체학에서 WGA가 중요한 이유W..

🔬 PCR과 RT-PCR이란?**PCR (Polymerase Chain Reaction)**과 **RT-PCR (Reverse Transcription PCR)**은 현대 생명과학 실험에서 가장 기본이자 핵심이 되는 분자생물학 기술입니다. 감염 질환 진단, 유전자 클로닝, 유전체 연구까지—이 기술 없이 실험을 진행하는 건 상상할 수 없습니다.PCR은 DNA의 특정 구간을 수백만 배로 증폭시켜 분석과 조작을 가능하게 해줍니다. 반면 RT-PCR은 RNA로부터 cDNA를 합성한 후 이를 PCR로 증폭하는 방식으로, RNA 기반 분석에 매우 유용합니다.무엇보다 중요한 건 어떤 DNA polymerase를 선택하느냐입니다. 특히 Taq DNA Polymerase, proofreading 기능, OneTaq, ..

Site-Directed Mutagenesis 완벽 가이드소개Site-directed mutagenesis (SDM)는 DNA 염기서열에 특정한 변이를 도입할 수 있는 강력한 분자생물학 기술입니다. 이 기술은 유전자 기능, 단백질 구조, 효소 활성을 연구하는 데 매우 유용합니다. Site-Directed Mutagenesis란?사이트 지향 돌연변이는 DNA의 특정 염기를 의도적으로 바꾸어 단백질 서열에 변화를 주는 기술입니다. 무작위 돌연변이 유도법과는 달리, 정확하고 반복 가능한 결과를 얻을 수 있습니다.활용 분야단백질 공학: 안정성, 활성, 기질 특이성을 향상시키는 변이 도입기능 유전체학: 특정 돌연변이를 통해 유전자 기능 분석질병 모델링: 유전질환 관련 변이를 실험적으로 재현신약 개발: 단백질-약물..

Q5 Site-Directed MutagenesisSite-Directed Mutagenesis(SDM)는 플라스미드 DNA에 특정 변이를 도입할 수 있는 분자생물학의 핵심 기술입니다. 유전자 기능 연구, 단백질 구조 분석, 코돈 최적화 등에 활용되며, 정밀한 유전자 변형을 가능하게 합니다.Site-Directed Mutagenesis란?SDM은 플라스미드 내에서 뉴클레오티드의 삽입, 삭제 또는 치환을 가능하게 합니다. 주요 응용 분야:유전자 발현 연구단백질 구조/기능 분석번역 후 변형 연구전사 인자 결합 부위 조절제한 효소 인식 부위 생성/제거코돈 최적화Q5 Site-Directed Mutagenesis 키트(NEB #E0552)는 강력한 고정밀 PCR 기반 워크플로우로 이 과정을 쉽게 만들 수 있습니..

클로닝 워크플로우에서 라이게이션 반응을 위한 벡터와 인서트의 최적량클로닝은 분자생물학의 기본 기술이며, 라이게이션 반응을 올바르게 설정하는 것이 성공의 핵심입니다. 연구자들이 가장 자주 묻는 질문 중 하나는:"라이게이션 반응에 얼마나 많은 벡터와 인서트를 사용해야 하나요?"이에 대한 답은 DNA 단편의 크기, 벡터 대 인서트 비율, 라이게이션 효율 등 여러 요소에 따라 달라집니다. 이 가이드에서는 표준 권장사항을 자세히 설명하고 클로닝 워크플로우를 최적화하기 위한 단계별 접근법을 제공합니다.라이게이션 반응에서 질량보다 몰 비율이 중요한 이유라이게이션을 설정할 때, 많은 초보자들이 DNA의 질량(ng)에만 집중하고 분자 수(fmoles/pmoles)를 고려하지 않는 실수를 합니다. 왜 이것이 문제인지 설명..